導(dǎo)語(yǔ)：如何才能寫好一篇五大陸游記，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

Wild Parrots of Telegraph Hill

特利格拉夫山的野鸚鵡(2003)

Filmmaker Judy Irving looks in on the life of down-and-out[窮困潦倒的] musician Mark Bittner

who lives on San Francisco’s Telegraph Hill. There, he enters into communication and

communion[交流] with a flock[群] of some 50 wild parrots, who have distinctive personalities and eventually change his outlook[見(jiàn)解] on life. You will love this heartwarming film.

電影制片人

朱迪?歐文帶我們走進(jìn)落魄音樂(lè)家馬克?比特訥的生活。比特訥住在(美國(guó))舊金山的特利格拉夫山。在那里,他和50只野鸚鵡建立了融洽的關(guān)系,互相交流,而這些各具個(gè)性的鸚鵡最終改變了他的人生觀。你會(huì)愛(ài)上這部感人的電影。

Arctic Tale北極傳說(shuō)(2007)

Arctic Tale gives you close-up and unforgettable profiles[簡(jiǎn)介] of Nanu, a polar bear cub[幼獸], and Seelu, a seal pup[幼畜], as they struggle to survive changing environmental conditions that threaten their habitat[棲息地] and their lives. With these lovable animals

leading the way, the film swims directly and deeply into disturbing environmental

issues[問(wèn)題] global warming, pollution,

and, most especially, the shrinking

arctic ice.

《北極傳說(shuō)》為你近距離地描述了北極熊幼熊娜努和小海豹希努的難忘故事――不斷變化的自然環(huán)境威脅著它們的棲息地和生命,它們要在這種環(huán)境中求生。在這兩只可愛(ài)的小動(dòng)物的帶領(lǐng)下,電影直接而深入地探討了令人不安的環(huán)境問(wèn)題――全球變暖、污染,尤其是北極冰層的不斷縮減。

Grizzly Man 灰熊人(2005)

In October 2003, grizzly bear activists[積極分子]

Timothy Treadwell and Amie Huguenard were killed by the Alaskan bears they’d been following and studying.

Famed director Werner Herzog uses the pair’s

archival[檔案的] footage[電影膠片] plus interviews with their friends, family, colleagues and bear experts to

examine their lifestyle, motivation and experiences.

The film is a fascinating study of human interaction[相互作用]

with wild animals, and the footage of the bears is

absolutely phenomenal[出眾的].

2003年10月,灰熊保護(hù)積極分子蒂莫西?崔德威爾和阿米?于格納爾被他們一直追蹤研究的阿拉斯加熊殺死。著名導(dǎo)演沃納?赫爾佐格通過(guò)兩人的影像檔案資料,加上對(duì)其朋友、家人、同僚和灰熊專家的訪問(wèn),回溯了他們的生活方式、動(dòng)力和經(jīng)歷。這是一部研究人與野生動(dòng)物互動(dòng)的佳作,灰熊的影像片段更是意義非凡。

Winged Migration

鳥(niǎo)與夢(mèng)飛行

(一譯《遷徙的鳥(niǎo)》)(2001)

French directors Jacques Perrin and Jacques Cluzaud and their crew of 500 people spent four years and spanned the globe to capture the beautiful images of various species of migrating birds as they fly thousands of miles twice annually[一年一次] in search of food. An amazing cinematic[電影的] achievement.

法國(guó)導(dǎo)演雅克?貝漢和雅克?

克魯奧德連同500名工作人員花了4年時(shí)間踏遍整個(gè)地球,捕捉到各種候鳥(niǎo)每年兩次飛行數(shù)千英里尋找食物的美麗畫面。這是一個(gè)無(wú)與倫比的電影成就。

Wolves: A Legend Returns to Yellowstone

狼族:重返黃石公園(2007)

Wolves, so often m aligned[誹謗] in legend, have been hunted and slaughtered[屠殺] almost to the point of[達(dá)到……的程度]

extinction. They are still on the endangered species list, but these fascinating creatures are making a comeback in

Yellowstone. This is their story, and it’s a great one!

狼在傳說(shuō)中經(jīng)常被人中傷。它們一直被捕獵和大量屠殺,瀕臨絕種邊緣。雖然它們?nèi)匀槐涣腥霝l危物種名單,但這些神奇的生物逐步重返(美國(guó))黃石公園。這是它們的故事,一個(gè)偉大的故事!

March of the Penguins

帝企鵝日記(2005)

March of the Penguins takes you into the harsh environment of Antarctica, where Emperor Penguins gather annually to go through their rituals[儀式] of building their nests, finding mates and propagating[繁殖]

their species[物種]. They endure amazing hardships. And, as this film shows, they may be cute, but

penguins are truly tough birds.

《帝企鵝日記》帶你走進(jìn)南極洲嚴(yán)酷的環(huán)境。在那里,帝企鵝每年都要進(jìn)行筑巢、尋找伴侶和繁衍后代等一系列“儀式”,歷盡艱辛。另外,正如電影向人們展示的那樣,雖然企鵝很可愛(ài),但它們其實(shí)很能吃苦。

相關(guān)鏈接

2008年4月21日,迪士尼公司特別選在世界地球日的前一天宣布公司新品牌“迪士尼自然”(Disneynature)成立。迪士尼將在這個(gè)品牌下制作高品質(zhì)的自然電影紀(jì)錄片。作為迪士尼家族的新成員,“迪士尼自然”把視角對(duì)準(zhǔn)我們賴以生存的這個(gè)星球,同時(shí)依托迪士尼的強(qiáng)大商業(yè)平臺(tái)(媒體、出版物、授權(quán)產(chǎn)品、主題公園和教育機(jī)構(gòu)等)向人們宣揚(yáng)環(huán)保理念。

打頭陣的是全境展現(xiàn)地球勝景的紀(jì)錄片《地球》(Earth),已于2009年的世界地球日(4月22日)推出。

篇2

Buffalo WZR-AMPG300NH高速無(wú)線路由器

巴比祿公司是日本最大計(jì)算機(jī)外設(shè)產(chǎn)品廠商Melco集團(tuán)的中國(guó)臺(tái)灣省子公司，其獨(dú)家開(kāi)發(fā)的AOSS(AirStation One-Touch Secure System，即一鍵式無(wú)線簡(jiǎn)單設(shè)置系統(tǒng))只需一按就可以實(shí)現(xiàn)無(wú)線網(wǎng)絡(luò)設(shè)備連接和加密，安全性非常之高。WZR，AMPG300NH路由器完美支持802.11a／b/g／n網(wǎng)絡(luò)協(xié)議，其最大傳輸速率可達(dá)300Mb／S。該路由器螺旋槳狀的天線更是叫你過(guò)目難忘。對(duì)復(fù)式結(jié)構(gòu)或大空間的房屋來(lái)說(shuō)，三天線路由器信號(hào)的強(qiáng)大穿透力可以幫助你把信號(hào)覆蓋到房間的每一個(gè)角落。若你已經(jīng)擁有迅馳四代的筆記本電腦或其他高速無(wú)線設(shè)備的話，推薦選擇這款高質(zhì)也高價(jià)的高速無(wú)線路由器。

Appie AirPort’Extreme Base StatIon高速無(wú)線路由器

在工業(yè)設(shè)計(jì)方面一向領(lǐng)先的Apple，其產(chǎn)品無(wú)論在美觀程度和開(kāi)發(fā)理念上都有獨(dú)到之處，受到很多潮流人士的追捧。這款被Fans昵稱為“豆腐”的AirPort Extreme Base Station無(wú)線路由器完美支持802.lla／b/g／n網(wǎng)絡(luò)協(xié)議?！岸垢北趁鎿碛卸齻€(gè)LAN口，相比其他無(wú)線路由來(lái)說(shuō)少了一個(gè)LAN口。背面的uSB口可以作為打印服務(wù)器或共享服務(wù)器來(lái)連接打印機(jī)或uSB接口移動(dòng)硬盤在網(wǎng)內(nèi)共享。和所有Apple的產(chǎn)品一樣，“豆腐”的價(jià)格同樣毫不遜色。產(chǎn)品可以在各地的蘋果專賣店訂購(gòu)。

NETGEAR WGT624無(wú)線路由器

網(wǎng)件(NETGEAR)的產(chǎn)品以時(shí)尚美觀而著稱。WGT624采用標(biāo)準(zhǔn)“白金家族”外觀設(shè)計(jì)，它的表面質(zhì)地光滑考究，轉(zhuǎn)角弧度平滑。WGT624的智能向?qū)茏詣?dòng)檢測(cè)ISP線路類型并減少設(shè)置錯(cuò)誤，讓你的連接設(shè)置少于五步。使用智能向?qū)?-固件升級(jí)幫助特性只需點(diǎn)T鼠標(biāo)就能自動(dòng)檢查新的特性和升級(jí)你的網(wǎng)絡(luò)。遺憾的是wGT624僅有2dB的增益天線，信號(hào)的穿墻效果也一般。

Buffalo WHR-HP-G54S-AP無(wú)線路由器

最高速率達(dá)到125Mb的wHR-HP-G54S-AP無(wú)線路由器是任天堂推薦列表中WHR-HP-G54S的改進(jìn)型，事實(shí)上Buffalo幾乎所有的無(wú)線路由都印有nintendo WiFi標(biāo)志。只要選擇了印有這個(gè)標(biāo)志的無(wú)線路由一般都可以無(wú)需設(shè)置即可連接NDSL。該產(chǎn)品采用頻率為200MHz的Broadcom 5352芯片、16MB的內(nèi)存、4dB增益天線，算是中低價(jià)位內(nèi)的“高配”了。稍有遺憾的是4MB Flash對(duì)于一些第三方固件來(lái)說(shuō)稍小了一些。

Linksys WRT54GC無(wú)線路由器

對(duì)于既追求高穩(wěn)定性又追求便攜性的用戶來(lái)說(shuō)，這款WRT54GC無(wú)線路由器確實(shí)是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。它體型非常的小巧，大概也就一個(gè)手掌那么大，你甚至可以將它輕松地放在口袋里。作為一款符合802.1 lg標(biāo)準(zhǔn)的無(wú)線路由器，WRT54GC可以為我們提供理論最高54Mbps的無(wú)線連接速率。它支持無(wú)線AP和無(wú)線路由兩種模式，我們可以根據(jù)實(shí)際網(wǎng)絡(luò)情況選擇合適的模式。但1dB的增益天線并不能提供很好的穿墻能力，若你的家里房間很多或面積比較大，那就不值得推薦了。

篇3

關(guān)鍵詞:跨既有鐵路線 封閉絕緣掛籃 設(shè)計(jì)

1工程概況

新建天津至秦皇島鐵路客運(yùn)專線下塢薊運(yùn)河特大橋D段跨津山鐵路連續(xù)梁，起訖里程DK87+928.54～DK88+150.24，為一座一聯(lián)三跨(60m＋100m＋60m）連續(xù)梁橋,墩位編號(hào)559#～562#。主跨100m斜跨既有津山線津山鐵路上下行，交匯處既有津山線里程約為JSK226+305，橋梁中心線與津山鐵路的夾角20.42°。上部梁體施工時(shí)，施工影響區(qū)域內(nèi)封閉式掛籃底與鐵路軌頂最小凈空不足8m,距接觸網(wǎng)承力索最小凈空不足1m。如下圖所示：

2總體施工方案及總體布置

2.1總體施工方案

箱梁施工，特別是中跨箱梁施工是本段跨既有津山鐵路施工的控制點(diǎn)。如何在行車不中斷的條件下，保證行車和施工安全，是本段施工的重點(diǎn)和難點(diǎn)。對(duì)于中跨箱梁跨線

懸澆施工的安全防護(hù)，在對(duì)棚架防護(hù)普通掛

籃法和封閉式掛籃法進(jìn)行方案比選，結(jié)合以往跨線施工的成功經(jīng)驗(yàn)，決定采用封閉式掛籃懸澆法施工，以防施工物件掉落，確保行車安全。所謂封閉式掛籃，即在普通掛籃的基礎(chǔ)上，采用型鋼結(jié)合彩鋼板(型鋼及特制絕緣不透水材料)對(duì)普通掛籃底模平臺(tái)的前端和兩側(cè)進(jìn)行封閉，同時(shí)在相應(yīng)位置掛設(shè)安全網(wǎng)（從主桁所在平面開(kāi)始往下掛設(shè)安全密目網(wǎng)），底部為防止接觸網(wǎng)高壓對(duì)掛籃產(chǎn)生感應(yīng)電勢(shì)和放電，滿布6mm厚環(huán)氧樹(shù)脂絕緣板并可靠接地（通過(guò)型鋼過(guò)渡并滿鋪3mm鋼板，并在其上通過(guò)特殊工藝涂刷特制絕緣不透水材料），以使掛籃具備防墜物和防觸電功能。封閉式掛籃底至梁底建筑高度按1.10m（含掛籃滑移時(shí)降落空間）設(shè)計(jì)。相比棚架防護(hù)普通掛籃法，封閉式掛籃法的最大特點(diǎn)是不破壞原有鐵路路基、亦不影響行車，非常適合本段跨既有津山線箱梁施工。

2.2 施工總體步驟

調(diào)查了解施工范圍內(nèi)地下管線和接觸網(wǎng)、自閉貫通線改移地下管線和接觸網(wǎng)、自閉貫通線及防護(hù)欄設(shè)立施工警戒線插打津山線路基側(cè)鋼板樁支護(hù)施工鉆孔樁插打基坑防護(hù)鋼板樁開(kāi)挖承臺(tái)基坑、施工承臺(tái)回填基坑拔除鋼板樁（靠既有津山線路側(cè)不拔除）墩身施工封閉式掛籃法連續(xù)箱梁施工拆除連續(xù)箱梁掛籃拆除防護(hù)警戒設(shè)施恢復(fù)原地貌。

3封閉絕緣掛籃細(xì)部設(shè)計(jì)與安裝

3.1 跨既有線施工安全要求

連續(xù)梁施工跨越鐵路既有高壓線時(shí)，由于施工掛籃距離高壓線都比較近，很容易造成人員觸電和線路短路的問(wèn)題。

連續(xù)梁施工跨越既有線時(shí)，必須滿足以下安全要求：

（1）、不允許由于施工安全防護(hù)不夠的原因引起人員觸電；

（2）、不允許由于施工設(shè)施絕緣不好的原因引起線路短路；

（3）、不允許在施工時(shí)往鐵路線路上跌路物品；

（4）、不允許在施工時(shí)往鐵路線路上漏水。

3.2 掛籃施工時(shí)可能出現(xiàn)的安全隱患

（1）、施工掛籃一般距離鐵路既有線距離都比較近，很容易產(chǎn)生高壓電線對(duì)掛籃之間的空氣擊穿，掛籃鋼結(jié)構(gòu)又有許多尖角和鋼鐵毛刺，即使距離較遠(yuǎn)，也可能產(chǎn)生電氣尖

端放電，這樣勢(shì)必會(huì)造成掛籃帶電和線路短路；

（2）、施工掛籃距離既有線距離較近時(shí)，由于既有線的周圍有很強(qiáng)的電磁場(chǎng)，在施工掛籃上就會(huì)產(chǎn)生感應(yīng)電壓，當(dāng)這種電壓超過(guò)安全電壓（50V）時(shí)，就會(huì)危及施工人員的生命安全；

（3）、施工掛籃底托的橫梁和縱梁都是鏤空連接，中間空隙很大，在施工時(shí)很容易掉落物品，當(dāng)有列車行駛時(shí)安全隱患很大；當(dāng)澆筑混凝土和天氣下雨時(shí)都會(huì)往下流水，當(dāng)這種流水形成線時(shí)，一旦和既有線通接，就會(huì)出現(xiàn)線路短路，掛籃帶電造成人員觸電。

3.3 封閉絕緣掛籃的設(shè)計(jì)

中跨梁段施工時(shí)，為保證既有鐵路行車與人身安全，須在普通平弦式掛籃的基礎(chǔ)上安裝封閉、絕緣系統(tǒng)。本掛籃封閉系統(tǒng)、絕緣系統(tǒng)的設(shè)計(jì)，遵循“結(jié)構(gòu)安全、封閉到位、絕緣有效”的原則。

3.3.1.封閉系統(tǒng)設(shè)計(jì)

封閉系統(tǒng)分底面和立面兩大部分（如圖1、圖2）。具體措施如下：

（1）、底面封閉措施

掛籃底面包括底模平臺(tái)和前操作平臺(tái),封閉方法是在底面空隙區(qū)域滿鋪3mm厚花紋鋼板，以保證其剛度滿足墜物打擊或人員行走等工況要求。

底模平臺(tái)包括底板部分、翼緣板部分兩個(gè)區(qū)域。其中底板部分因底模是一個(gè)完整的平臺(tái)，其本身無(wú)需再安裝封閉設(shè)施，只需做好與前操作平臺(tái)的搭接即可。翼緣板部分在封閉前，先將其上的焊接分配梁，再滿鋪花紋鋼板。

前操作平臺(tái)在封閉前，先對(duì)其進(jìn)行改制，設(shè)置懸臂梁并與底?？v梁焊接，以利立面后期封閉欄桿和絕緣系統(tǒng)的設(shè)置，滿足前操作平臺(tái)的活動(dòng)空間和受力要求。改制完成后再在上面滿鋪花紋鋼板。

（2）、立面封閉措施

掛籃立面包括前端面、左右側(cè)面、后端面（翼緣區(qū)域）共三部分。掛籃立面封閉方法是：在掛籃底模平臺(tái)四周設(shè)置角鋼桁架圍欄，在其內(nèi)側(cè)鉚釘彩鋼板，并與掛籃前后上橫梁綁扣密目安全網(wǎng)。

3.3.2.絕緣系統(tǒng)設(shè)計(jì)

（1）、在施工使用的掛籃底部用3mm厚的鋼板與橫梁、縱梁焊接在一起，橫梁上面焊接的鋼板需要將鋼板做成U形，尺寸根據(jù)橫梁的尺寸確定，與橫梁緊貼焊接，這樣就形成了一個(gè)相對(duì)的平板電極，能夠均勻的接受來(lái)自既有線的電場(chǎng)沖擊；當(dāng)鋼板焊接完成后在鋼板的背面進(jìn)行防水處理，這樣就可以解決漏水和落物的問(wèn)題（在鋼板的焊接時(shí)，不能把鋼板焊穿；在鋼板焊接成型后，在鋼板的表面不能有尖角、毛刺，如果有，應(yīng)該用砂輪打磨平整，圓滑；因?yàn)殇摪迳弦休d很大的重量，焊點(diǎn)要求不能虛焊）。

（2）、在鋼板焊接形成的電極對(duì)既有線的一面制作絕緣層，采用絕緣樹(shù)脂，加專用固化劑、活性稀釋劑、白碳黑、消泡劑，采用樹(shù)脂配合無(wú)堿玻璃絲布施工的方法，直至達(dá)到要求的絕緣厚度，這樣就可以避免產(chǎn)生電氣空氣擊穿和拉弧。在制作絕緣樹(shù)脂層時(shí)要求要搭建臨時(shí)施工棚，在施工棚內(nèi)加溫，要求溫度達(dá)到20℃，滿足絕緣樹(shù)脂的固化條件；把需要制作絕緣樹(shù)脂部位的鋼板打磨除銹，進(jìn)行酸洗，磷化，鈍化；為了使絕緣樹(shù)脂和鋼板更好的結(jié)合，底涂采用固體絕緣樹(shù)脂，加活性稀釋劑，加固化劑，在鋼板的表面刷上1mm厚的混合絕緣樹(shù)脂，需要室溫固化12小時(shí)）；在掛籃四周護(hù)欄上裝上絕緣板，防止人員頭、手和施工物品外露，進(jìn)一步保證施工人員的安全。

（3）、制作一個(gè)接地電極，深埋于地下，進(jìn)行降阻處理（要求接地電阻小于4歐姆），用接地鋼帶將掛籃和鋼板電極焊接在一起，保證良好的接地，形成掛籃對(duì)地零電位，這

樣就解決了感應(yīng)電壓形成的安全隱患問(wèn)題。

（4）、設(shè)計(jì)制作一套電壓在線監(jiān)測(cè)系統(tǒng)和自動(dòng)報(bào)警系統(tǒng)，適時(shí)了解鋼板電極上所承載的電壓，當(dāng)電極的電壓超過(guò)安全電壓時(shí)，監(jiān)測(cè)系統(tǒng)自動(dòng)反饋到報(bào)警系統(tǒng)，形成聲、光同時(shí)報(bào)警，能夠讓施工人員及時(shí)采取保護(hù)措施，進(jìn)一步保證施工的安全。

這樣就形成了一套安全的防護(hù)系統(tǒng)，能夠極大的提高施工效率，即能滿足鐵路安全部門的安全要求，又能保證施工人員的生命安全和鐵路的正常運(yùn)行。

3.3.3.封閉、絕緣系統(tǒng)安裝

0#塊澆筑完成后，先吊裝掛籃走行軌道、走行支腿和主梁，安裝后錨固，吊裝前后上橫梁。在1'#塊梁底對(duì)應(yīng)位置拼裝掛籃底模平臺(tái)、安裝底模，再通過(guò)千斤頂、鋼絞線、導(dǎo)鏈等設(shè)備將底模平臺(tái)系統(tǒng)提升至距地面約1.50m，焊接絕緣系統(tǒng)的角鋼附著架，改制前操作平臺(tái)，安裝附著架底面絕緣板，鋪設(shè)封閉花紋鋼板，再將底模平臺(tái)整體提升至設(shè)計(jì)位置，掛籃側(cè)模滑移到位，最后焊接立面欄桿，安裝立面絕緣板、彩鋼板，綁扣密目安全網(wǎng)，形成完整的封閉絕緣體系。

4結(jié)語(yǔ)

篇4

【摘要】

目的 應(yīng)用生物信息學(xué)分析軟件預(yù)測(cè)細(xì)粒棘球蚴中國(guó)大陸株鐵蛋白（Eg. ferritin）氨基酸序列的結(jié)構(gòu)與功能。方法 利用DNAman、NCBI/BLAST公共數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)目的基因的同源性進(jìn)行比較分析。應(yīng)用DNAstar、Biosun 等生物分析軟件對(duì)鐵蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)、抗原表位進(jìn)行預(yù)測(cè)分析，應(yīng)用SWISSMODEL對(duì)蛋白的三維結(jié)構(gòu)進(jìn)行模擬。結(jié)果 檢索Eg. ferritin氨基酸序列在其功能區(qū)的130AA內(nèi)同源性為97.7%。不同生物間的同源性平均達(dá)40.79%。生物軟件預(yù)測(cè)：Eg. ferritin的分子量約16.7 kD，含非極性氨基酸68個(gè)，預(yù)測(cè)其抗原表位肽段為7N-12E，36H -43V， 55S-62H， 69Q-76R， 82A-89E， 102I-107E， 117A -124S，129L-136T。結(jié)論 Eg. ferritin的結(jié)構(gòu)和功能及其抗原表位的預(yù)測(cè)對(duì)選取有價(jià)值的抗原肽段提供了依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 細(xì)粒棘球蚴中國(guó)大陸株；鐵蛋白；生物信息學(xué)；預(yù)測(cè)分析

Abstract: Objective To predict the structure and function of Eg.ferritin using bioinformatics method. Methods Homology of ferritin gene was analyzed Using DNAman and NCBI/BLAST database and second structure and antigen peptide of Eg.ferritin and imitate 3D structure of Eg.ferritin was predicted using DNAstar， Biosun et.al. biological softwares to. Results Deduced ferritin amino acid sequence homology was 97.7% in the 130AA and average homology of different species was 40.79% with the published ferritin gene. And it had 68 nonpolar amino acids and had 9 antigen peptide such as 7N-12E， 36H -43V， 55S-62H， 69Q-76R， 82A-89E， 102I-107E， 117A-124S， 129L-136T. Conclusions Using softwares to predict Eg.ferritin structure and antigen peptide can provide some theoretical bases for selecting some valuable antigen peptides.

Key words： echinococcus granulosus；ferritin；bioinformatics；predicting analysis

鐵蛋白（ferritin) 是普遍存在于生物體內(nèi)的一種保守性較高的多功能多亞基蛋白，它不僅調(diào)節(jié)體內(nèi)鐵的含量，而且在抵抗氧化損害、調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖及機(jī)體的免疫反應(yīng)等方面發(fā)揮了重要作用［1-4］。據(jù)此推斷鐵蛋白在寄生蟲(chóng)的生理代謝活動(dòng)中擔(dān)負(fù)著十分重要的作用，因此，它也成為各種寄生蟲(chóng)疫苗研究中備受關(guān)注的候選分子。本文通過(guò)生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)細(xì)粒棘球蚴中國(guó)大陸株鐵蛋白（Eg. ferritin）氨基酸序列的結(jié)構(gòu)與功能，為進(jìn)一步研究其生物學(xué)功能提供線索，為其在肝包蟲(chóng)的診斷、藥物研發(fā)和疫苗篩選方面提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

Eg. ferritin基因由本實(shí)驗(yàn)室通過(guò)RT-PCR成功擴(kuò)增，其它寄生蟲(chóng)ferritin氨基酸序列源自GenBank。

1.2 方法

通過(guò)DNAman、DNAstar對(duì)重組基因序列進(jìn)行分析并推算出其編碼的氨基酸序列。通過(guò)NCBI、BLAST在線軟件將Eg. ferritin cDNA序列與同源性較高的其它動(dòng)物ferritin基因序列進(jìn)行同源性分析。通過(guò)蛋白質(zhì)分析軟件Biosun和DNAStar將肽鏈的二級(jí)結(jié)構(gòu)（secondary structure）、親水性參數(shù)（hydrophilicity）、抗原性參數(shù)（antigenicity）、可塑性參數(shù)（flexibility）、表面可能性（Surface Probability）等5種參數(shù)綜合進(jìn)行抗原表位的預(yù)測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 Eg. ferritin基因開(kāi)放閱讀框基因序列

DNAman 軟件對(duì)測(cè)序后的鐵蛋白基因序列進(jìn)行分析，測(cè)序結(jié)果表明該基因開(kāi)放閱讀框?yàn)?35bp，基因序列，見(jiàn)圖1。

2.2 Eg. ferritin氨基酸序列的同源性分析

NCBI/Genbank/BLAST進(jìn)行氨基酸序列的比較分析結(jié)果表明，推導(dǎo)的鐵蛋白氨基酸序列是由145個(gè)氨基酸殘基組成，與已知Genbank中ferritin氨基酸序列比較，并且在其功能區(qū)內(nèi)的130AA同源性達(dá)97.7%。有三處氨基酸殘基 (陰影加黑標(biāo)記) 與發(fā)表序列存在差異，見(jiàn)圖2。

用DNAman 對(duì)不同生物的鐵蛋白氨基酸序列進(jìn)行同源性分析，其中與牛帶絳蟲(chóng)(Taenia saginata)、日本血吸蟲(chóng)(Schistosoma japonicum)、人鐵蛋白H鏈、曼氏血吸蟲(chóng)(Schistosoma mansion)和肝片蟲(chóng)(Fasciola hepatica)的ferritin平均同源性達(dá)40.79%。圖3（見(jiàn)封2）中黑色標(biāo)記區(qū)域同源性達(dá)100%，粉色為75%，綠色為50%，黃色為33%。

2.3 Eg. ferritin二級(jí)結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)和蛋白三維結(jié)構(gòu)的模擬

Biosun軟件對(duì)蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)中α螺旋水平較高，而且該Eg. ferritin在真核及原核生物中未發(fā)現(xiàn)信號(hào)序列酶切位點(diǎn)，也未發(fā)現(xiàn)穿膜結(jié)構(gòu)域（圖4）。DANstar 對(duì)Eg. ferritin的氨基酸序列進(jìn)行預(yù)測(cè)，見(jiàn)表1。表1 Eg.ferritin所含氨基酸種類（略）

DNAstar和Biosun軟件對(duì)Eg. ferritin親水性參數(shù)、可塑性參數(shù)以及抗原表位肽段進(jìn)行預(yù)測(cè)，兩種軟件的預(yù)測(cè)結(jié)果基本符合，見(jiàn)表2、3。表2 Eg. ferritin中20種氨基酸可塑性參數(shù)（略）表3 Eg.ferriti抗原肽段的預(yù)測(cè)（略）

3 討論

隨著基因組和功能基因組研究的深入，生物信息學(xué)理論和方法也得到了迅猛發(fā)展和廣泛應(yīng)用。利用生物信息學(xué)方法對(duì)蛋白的二級(jí)及三級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析和模擬是一種快捷有效的方法［5-6］。本實(shí)驗(yàn)室于2006年成功克隆出細(xì)粒棘球蚴中國(guó)大陸株Eg. ferritin［7］并注冊(cè)到GenBank。經(jīng)DNAman軟件對(duì)本室擴(kuò)增的Eg. ferritin基因序列進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)該序列與互聯(lián)網(wǎng)上檢索序列(肯尼亞株)有所不同：檢索的基因序列為522bp，而我們得到的基因序列長(zhǎng)度為562bp，并推導(dǎo)出其包含145AA。在NCBI/BLAST公共數(shù)據(jù)庫(kù)中氨基酸序列在130AA內(nèi)同源性達(dá)97.7%。Thompson研究認(rèn)為細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)在長(zhǎng)期的演化過(guò)程中會(huì)引起遺傳基因的改變［8］，據(jù)此我們考慮該基因可能是我國(guó)細(xì)粒棘球蚴蟲(chóng)株特有的，有望作為預(yù)防當(dāng)?shù)匕x(chóng)病疫苗的候選基因，可能在蟲(chóng)株的鑒別診斷上也有一定的應(yīng)用價(jià)值。

利用DNAman等生物學(xué)軟件推導(dǎo)鐵蛋白的氨基酸序列，預(yù)測(cè)其蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)和抗原表位，以及模擬其三級(jí)結(jié)構(gòu)。經(jīng)軟件分析的結(jié)果來(lái)看，鐵蛋白是生物體中的一個(gè)保守性很高的蛋白，并在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中被保留下來(lái)，其具有的相同氨基酸序列，可能是影響整個(gè)鐵蛋白功能的核心區(qū)即功能域；DNAstar，Biosun對(duì)其二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了預(yù)測(cè)，結(jié)構(gòu)顯示在Eg.ferritin中α螺旋水平較高，說(shuō)明該蛋白的柔韌性和彈性較好，具有較好的穩(wěn)定性，在真核及原核生物中未發(fā)現(xiàn)信號(hào)序列的酶切位點(diǎn)和跨膜結(jié)構(gòu)域，并且兩軟件對(duì)鐵蛋白抗原肽段的預(yù)測(cè)結(jié)果基本一致，提高了預(yù)測(cè)的可靠性。這些區(qū)域和結(jié)構(gòu)的確認(rèn)為鐵蛋白功能的進(jìn)一步探索提供了一定的參考資料，并且為后續(xù)選取Eg. ferritin中有抗原價(jià)值的肽段，制備多肽段聯(lián)合疫苗提供了一種可借鑒的手段。

參考文獻(xiàn)

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